Санитарно-показательные микроорганизмы
Определение колли-индекса и колли-титра воды (метод мембранной фильтрации).
Колли-титр воды - это минимальное количество воды, в которой обнаруживаются бактерии группы кишечных палочек (БГКІІ ).
Колли-индекс воды - это количество БГКП в 1 л воды. Норма - не более 3.
Определение колли-титра проводят в асептических условиях с использованием фильтрационной установки, которая представляет собой фильтродержатель с мембранным фильтром, соединенным с приемником. Фильтродержатель состоит из лейки с крышкой и основы из пористой пластины, на которую помещают мембрану. Используют полимерные нитроцеллюлозные фильтры (№3) размером пор 0,45±0,02 мкм и диаметром 47 мм. Фильтрование воды проводят под вакуумом 93.3 кПа.
Перед взятием пробы водопроводной воды кран обжигают, как указано выше, спускают воду на протяжении 10 мин, затем отбирают в стерильную бутыльобъемом 500 мл. Исследуемую пробу пропускают через фильтр, потом его вытягивают из фильтродержателя и помещают нижним краем в чашку со средой Ендо. После инкубации в термостате при температуре 37 °С на протяжении 24 ч подсчитывают количество колоний, типичных для БГКП - малинового цвета с металлическим блеском (или без него). Принадлежность к БГКП подтверждают также окраской по Грамму (граммотрицательные), выявлением ферментации глюкозы (микробиологические методики).
Учет результатов. Количество колоний бактерий, которые отвечают вышеупомянутым характеристикам, умножают на 2, определяя содержимое в 1л, что отвечает колли-индексу, по значению которого вычисляют колли-титр воды. Например, если количество колоний составляет 5, то в 1 л будет 5x2 = 10 (колли-индекс), а колли-титр составляет 1000 :10 = 100.
Микробное число воды - это количество микробов в 1 мл воды.
Определение общего микробного числа воды: кран водопровода обжигают пламенем ватного тампону, смоченного в спирте, после чего его открывают и на протяжении 10 мин спускают воду. Пробу воды отбирают в стерильную бутыль емкостью 500 мл (в случае хлорирования воды предварительно вносят 2 мл 1,5 %-го раствора гипосульфиа натрия), тщательно закрывают стерильной пробкой и доставляют к месту анализа, которые проводят с соблюдением правил асептики. Готовят 5 пробирок с 9 мл стерильной воды. Стерильной пипеткой отбирают 1 мл исследуемой пробы, вносят в первую пробирку, тщательно перемешивают и переносят 1 мл в следующую пробирку и дальше, разводя воду 1:10,1:100, 1:1000 и т.п.
Затем 1 мл воды из каждого разведения вносят каплями в чашки Петри, заливают 10 мл расплавленного и охлажденного до 45°С мясо-пептонного агара, осторожно перемешивают. После застывания агара чашки переворачивают кверху дном, подписывают (указывают место, время взятия пробы и разведение) и инкубируют в термостате при 37°С на протяжении 24 часов.
Учет результатов. Количество колоний, которые выросли на питательной среде (МПА), умножают на показатель разведения воды, из которого сделан этот высев (10, 100 и т.п.).
В соответствии с требованиями ДСАНПІН № 383, микробное число воды не должно превышать 100.